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鄭州PCR實驗室設(shè)計的基本規(guī)范有哪些？

河南中潤實驗室工程

2021-06-10 16:12:13

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　　PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。它通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達納米級別。那么鄭州PCR實驗室設(shè)計的基本規(guī)范有哪些呢？

　　一、標準的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)

　　將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區(qū)，整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，通過氣壓調(diào)節(jié)，使整個PCR實驗過程中，試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。

　　PCR實驗室可以是分散形式，也可以是組合形式。完成一組PCR實驗，通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個實驗過程，若實驗工藝需要，還應(yīng)增加樣品粉碎過程。

　　進入實驗室區(qū)域工作人員應(yīng)該按照以下路徑：

　　公共清潔區(qū)——更衣間（更換潔凈服）——緩沖間——污染實驗區(qū)

　　工作人員退出實驗室的路徑為：

　　污染實驗區(qū)——緩沖間——淋浴間（有條件的可設(shè)置）——更衣間——公共清潔區(qū)

PCR實驗室

　　二、PCR氣流組織設(shè)計

　　1、原始試劑混配室應(yīng)為正壓間，在微環(huán)境百級超凈臺內(nèi)操作，須防止其它程序功能間對本操作間的污染。

　　2、DNA提取室應(yīng)為微負壓間，須設(shè)置排風系統(tǒng)，以防止核酸提取時可能產(chǎn)生的氣溶膠對人員的侵害和對其它程序功能間的擴散污染。

　　3、PCR擴增室應(yīng)為微負壓間，須設(shè)置排風系統(tǒng)，以防止大量擴增產(chǎn)物對其它程序功能間的擴散污染。

　　4、檢測室應(yīng)為微負壓間，須設(shè)置排風系統(tǒng)，以防止擴增產(chǎn)物在電泳測序過程中的擴散污染。同時因3130分析儀散熱量較大，會提高室內(nèi)溫度3-5℃。

　　5、試劑混配室、DNA提取室、PCR擴增室、檢測室如設(shè)置緩沖間，功能間內(nèi)可均為正壓，而在緩沖間內(nèi)設(shè)置負壓，氣流從其雙道門的門縫處分別向緩沖間內(nèi)流動，用合理的氣流組織方式避免各功能間的交叉污染。

PCR實驗室

　　三、PCR實驗室壓差設(shè)計

　　PCR實驗室應(yīng)設(shè)計為負壓潔凈室，通過壓差控制，使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染，并且降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。

　　各個實驗室與非潔凈區(qū)之間的閘間保持正壓，＞10Pa，實驗與閘間之間的氣流組織方向為：試劑準備區(qū)空氣流向閘間，標本制備區(qū)流向閘間，而PCR擴增區(qū)氣流方向由閘間流向PCR擴增區(qū)，純化區(qū)同理。

　　同時按照試劑單向流方向，各個實驗室之間設(shè)計不同壓力梯度來實現(xiàn)單向氣流組織方向，由試劑準備區(qū)（+20Pa）、標本制備區(qū)（+15Pa）、擴增反應(yīng)一區(qū)（-5Pa）、純化區(qū)（-10Pa）、擴增反應(yīng)二區(qū)（-20Pa）、到后純化區(qū)（-25Pa）壓力逐漸降低，形成單向負壓壓力梯度。

PCR實驗室

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